1. Introduire l'éluant jusqu'à une hauteur d'environ 0,5 cm dans la cuve à chromatographie, puis la fermer. Les vapeurs d'éluant vont alors saturer la cuve.
2. Si les composés à analyser sont sous forme solide, les dissoudre dans un minimum de solvant.
3. Préparation de la plaque :
a) à environ 1 cm du bas de la plaque, tracer délicatement une ligne au crayon à papier ;
b) indiquer sur cette ligne les positions des dépôts que vous allez effectuer ;
c) effectuer les dépôts souhaités à l'aide de capillaires :
- plonger une extrémité du capillaire dans la solution : quelques millimètres de solution entrent dans le capillaire,
- sur la position choisie, poser verticalement, très peu de temps mais plusieurs fois, l'extrémité du capillaire (l'objectif est d'avoir un dépôt très concentré et peu étalé).
4. Placer verticalement la plaque dans la cuve, et la refermer rapidement. Au départ, l'éluant ne doit pas toucher les dépôts.
5. SANS BOUGER LA CUVE, attendre que l'éluant soit arrivé à environ 1 cm du bord supérieur.
6. Retirer la plaque et tracer rapidement au crayon à papier un trait indiquant la hauteur atteinte par l'éluant.